真田昌幸（1547年－1611年7月13日），日本战国时代军事家及大名，信浓上田城城主，真田幸隆三男，其兄为真田信纲、真田昌辉。生下四男七女，包括长男真田信幸及次男真田信繁。正室是寒松院，另有多名侧室。官位从五位下安房守。
昌幸出生后，其父幸隆把他送到甲斐充当人质，早年担任信玄的随侍，后被信玄安排入继武藤家，改名武藤喜兵卫。
1575年因兄长信纲和昌辉在长筱·设乐原之战阵亡，接任真田家督，深受武田胜赖信用。
1578年昌幸夺取上野北条氏领地沼田城及名胡桃城，驱逐沼田城代猪俣邦宪，因功获武田胜赖加封此领地。
1581年奉武田胜赖之命营建新府城。
1582年武田氏败亡，昌幸向织田氏大将泷川一益臣服。
本能寺之变后，北条氏在神流川之战击败泷川一益。昌幸先投北条氏，又将长子信幸送到德川氏成为人质。后信幸娶本多忠胜之女（德川家康养女），成为德川氏家臣。
1583年德川氏与北条氏联姻，要求昌幸将沼田城交还北条氏。昌幸拒绝，送次子信繁至上杉景胜处成为人质。
1585年德川氏与北条氏联合进攻昌幸，昌幸在第一次上田城之战击败德川军。
1586年上杉景胜归顺丰臣秀吉，真田昌幸臣从于秀吉之弟秀长。此后真田氏与尚未归顺秀吉的北条氏继续争斗。
1589年丰臣秀吉调停争端，规定名胡桃城归真田家；沼田城交北条氏，由猪俣邦宪管理。但猪俣邦宪私自夺取名胡桃城。
1590年丰臣秀吉因北条氏政不上京请罪，召集全日本大名发动北条征伐。真田昌幸被编入前田利家及上杉景胜的联合军。战后北条氏灭亡，真田氏领地得到确认，但首乱者猪俣邦宪未受重罚，相反秀吉惩罚了负责与北条氏交涉的家臣，名胡桃城事件可能是昌幸的苦肉计。昌幸也因其多谋，被秀吉称为“表里比兴之者”。
1598年8月，丰臣秀吉死亡。
1600年7月，德川家康向全日本大名下令讨伐上杉景胜，昌幸决定与次子信繁支持石田三成，长子信幸则追随德川家康。9月昌幸与信繁在第二次上田城之战阻击德川秀忠的优势兵力，导致秀忠未能及时参加关原之战。
关原之战后，德川家康本欲处决昌幸与信繁，但信幸与岳父本多忠胜拼死求情。最终昌幸与信繁被流放到九度山。流放期间昌幸曾请求赦免，遭到家康拒绝。
1611年昌幸在九度山病死。
